Produção de biofilme por isolados clínicos de Staphylococcus aureus, detecção de MSCRAMMs, detecção de genes do icaADBC operon e susceptibilidade a antimicrobianos
| dc.contributor.advisor | d'Azevedo, Pedro Alves | |
| dc.contributor.advisor-co | Caierão, Juliana | |
| dc.contributor.author | Stypulkowski, Jaíne Bruschi | |
| dc.date.accessioned | 2016-10-14T19:29:18Z | |
| dc.date.accessioned | 2023-10-09T13:59:46Z | |
| dc.date.available | 2016-10-14T19:29:18Z | |
| dc.date.available | 2023-10-09T13:59:46Z | |
| dc.date.date-insert | 2016-10-14 | |
| dc.date.issued | 2014 | |
| dc.description | Dissertação (Mestrado)-Programa de PósGraduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre. | pt_BR |
| dc.description.abstract | Staphylococcus aureus é um dos microrganismos Gram-positivos mais frequentemente isolados de pacientes com infecção relacionada à assistência à saúde (IRAS). Entre suas características de virulência está sua capacidade de formar biofilme e infecções causadas por isolados produtores de biofilme são frequentemente associadas a falhas terapêuticas. O envolvimento de biofilmes em infecções clínicas tem aumentado o interesse na caracterização de genes associados à sua formação. Além disso, torna-se necessário testar a atividade dos antimicrobianos mediante células bacterianas envoltas por biofilme, por serem essas células especialmente resistentes à ação da maioria dos antimicrobianos quando usados em concentrações padrão. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de produção de biofilme de isolados de S. aureus, detectar a presença de genes de virulência possivelmente envolvidos na formação do biofilme e testar a atividade de 04 antimicrobianos, comparando os resultados das atividades nas células de S. aureus em sua forma livre (MIC - Minimal Inhibitory Concentration) e em células envoltas por biofilme (MBIC - Minimum Biofilm Inhibitory Concentration). Os isolados de S. aureus estudados foram obtidos a partir de amostras clínicas de pacientes internados no Complexo Hospitalar Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre (CHSCMPA), no período de janeiro a julho de 2012. A detecção dos genes foi realizada pela técnica de PCR sendo pesquisados 13 genes: 09 MSCRAMMs (ebpS, eno, fnbA, fnbB, cna, fib.bbp, clfA e clfB) e 4 genes do operon ica (icaADBC). Os antimicrobianos testados foram a daptomicina, a linezolida, a tigeciclina e a vancomicina. Nenhum dos isolados apresentou resistência aos antimicrobianos quando avaliados pela técnica tradicional (MIC), realizada com as células no estado planctônico. Já a concentração necessária para inibir o crescimento das células em biofilme (MBIC) encontrada foi de 04 a 256 vezes maior do que a MIC dos mesmos isolados. Entre os antimicrobianos testados, a tigeciclina demonstrou melhor atividade no biofilme. Entre as MSCRAMMs pesquisadas as mais prevalentes foram clfB (92%), clfA (88%) e eno (85%), respectivamente, e entre os genes do operon, icaA e icaD foram detectados com maior frequência, ambos estiveram presentes em 87% dos isolados. Não houve correlação entre a distribuição dos genes pesquisados e a capacidade de formação de biofilme, indicando que somente um gene ou uma sequencia de genes não pode ser usado como indicador para a formação de biofilme por S. aureus, reiterando a complexidade do processo que envolve sua formação. | pt_BR |
| dc.description.abstract-en | Staphylococcus aureus is one of the most Gram-positive microorganisms frequently recovered from patients with healthcare-related infections. Among the virulence characteristics expressed by them is their ability to form biofilm. Biofilm-associated infections have a significant impact not only on the disease process itself but also on the ability of clinicians to effectively treat the infection. These infections have been increasing interest in the characterization of genes associated with their formation. Moreover, it is necessary to test the antimicrobial activity in bacterial cells surrounded by biofilm, being particularly those cells to the action of resilient most antimicrobial when used in standard concentrations. In this context, the aim of this study was to evaluate the ability to form biofilm of Staphylococcus aureus isolates, the presence of virulence genes possibly involved in biofilm formation, compare the in vitro activity of tigecycline, linezolid, daptomycin and vancomycin, against S. aureus in biofilms (MBIC - Minimum Biofilm Inhibitory Concentration) and as planktonic cells (MIC - Minimal Inhibitory Concentration). S. aureus isolates were obtained from clinical specimens from patients hospitalized in the Hospital Santa Casa de Misericordia de Porto Alegre (CHSCMPA), from January to July 2012. The detection of genes was performed by PCR and were researched 13 genes: 09 MSCRAMMs (ebps, ene, fnbA, fnbB, cna, fib.bbp, cIfA and clfB) and 04 genes of the ica operon (icaADBC). Were tested antibiotics daptomycin, linezolid, tigecycline and vancomycin. Isolates were fully susceptible to all antimicrobials evaluated. The MBIC results were considerably high, varying from 04 to at least 256 fold higher than MIC. Tigecycline showed better antibiofilm activity compared to the other antimicrobials, presenting the lowest MBIC / MIC ratio. Among the MSCRAMMs surveyed the most prevalent were clfB, cIfA and eno, respectively, and between genes of the operon, icaA and icaD were detected more frequently, both were present in 87% of the isolates. There was no correlation between distribution of genes and biofilm-forming ability for this isolates, indicating that only one or more genes can not be used as indicators for biofilm formation by S. aureus. | pt_BR |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/296 | |
| dc.language.iso | pt_BR | pt_BR |
| dc.relation.requires | Adobe Reader | pt_BR |
| dc.rights | Acesso Aberto Imediato | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ | * |
| dc.subject | Staphylococcus aureus | pt_BR |
| dc.subject | Biofilmes | pt_BR |
| dc.subject | Operon ica | pt_BR |
| dc.subject | MBIC | pt_BR |
| dc.subject | MSCRAMMs | pt_BR |
| dc.subject | [en] Biofilms | en |
| dc.title | Produção de biofilme por isolados clínicos de Staphylococcus aureus, detecção de MSCRAMMs, detecção de genes do icaADBC operon e susceptibilidade a antimicrobianos | pt_BR |
| dc.type | Dissertação | pt_BR |