Desenvolvimento de um novo método bioanalítico para a determinação de drogas de abuso em fluido oral utilizando Dried Oral Fluid Spot associado à placa de 24-poços por LC-MS/MS

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dc.contributor.advisorOliveira, Tiago Franco dept_BR
dc.contributor.advisor-coOliveira, Sarah Carobini Werner de Souza Eller Franco dept_BR
dc.contributor.advisor-coMerib, Josias de Oliveirapt_BR
dc.contributor.authorBorges, Gabriela Ramospt_BR
dc.date.accessioned2023-03-10T17:46:38Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:59:35Z
dc.date.available2023-03-10T17:46:38Z
dc.date.available2023-10-09T13:59:35Z
dc.date.date-insert2023-03-10
dc.date.issued2022
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractO uso de substâncias psicoativas, em especial as drogas de abuso, representa um grave problema socioeconômico e de saúde pública. O consumo de drogas está associado ao aumento das ocorrências de patologias e injúrias, incluindo manifestações neuropsiquiátricas e overdoses. Nesse contexto, o desenvolvimento de novas técnicas para a detecção de drogas de abuso em matrizes biológicas não convencionais, como o fluido oral, pode ser uma importante ferramenta para verificação do uso dessas substâncias. Este trabalho teve como objetivo desenvolver e validar um novo método bioanalítico utilizando dried oral fluid spot (DOFS) para a determinação de cocaína, benzoilecgonina, éster metil ecgonina, cocaetileno, hidroxicocaína, anfetamina, metanfetamina, MDMA, MDA, MDEA, femproporex, fenciclidina e cetamina em fluido oral por cromatografia líquida e espectrometria de massas em tandem. As amostras de fluido oral foram coletadas por expectoração e diluídas na proporção 1:1 (v:v) em água ultrapura. Os parâmetros críticos para a eficiência do DOFS foram avaliados por análises univariadas e multivariadas e as melhores condições foram escolhidas. Assim, uma alíquota de 100 μL de amostra foi pipetada no papel filtro, alocada em uma placa de 24-poços, seca durante 60 min, e os analitos foram extraídos com 250 μL do solvente extrator (acetonitrila e metanol; 1:3; v:v). A extração completa foi realizada em placas de 24-poços, possibilitando a análise de várias amostras simultaneamente. O método foi validado de acordo com recomendações internacionais (ANSI/ASB Standard 036) e em seguida a metodologia desenvolvida foi aplicada em 86 amostras de fluido oral. As curvas de calibração foram construídas na faixa de 1 – 100 ng/mL e os coeficientes de determinação (r 2 ) foram superiores a 0,99 para todos os analitos; os valores de limite de quantificação obtidos variaram de 1 a 5 ng/mL; Precisão intra- corridas foi de 3,05 a 13,01%; Precisão entre-corridas foi de 1,97 a 8,13%. O estudo de supressão/ganho de ionização indicou uma variação de -16,20 a 16,60%. Um total de 86% amostras positivas foi encontrado, sendo majoritariamente COC, BE, EME o que aponta para a aplicabilidade da metodologia proposta. Adicionalmente, os resultados obtidos podem colaborar para o fortalecimento de ações de toxicovigilância, minimizando as subnotificações associadas ao consumo destas substâncias.pt_BR
dc.description.abstract-enThe use of psychoactive substances, especially drugs of abuse, represents a serious socioeconomic and health problem. Drug use is associated with an increase in the occurrence of pathologies and injuries, including neuropsychiatric manifestations and overdoses. In this context, the development of new techniques for the detection of drugs of abuse in unconventional biological matrices, such as oral fluid, can be an important tool for verify the use of these substances. This work aimed to develop and validate a new bioanalytical method using dried oral fluid spot (DOFS) for the determination of cocaine, benzoylecgonine, ecgonine methyl ester, cocaethylene, hydroxycocaine, amphetamine, methamphetamine, MDMA, MDA, MDEA, fenproporex, phencyclidine, and ketamine in oral fluid by liquid chromatography and tandem mass spectrometry. Oral fluid samples were collected by expectoration and diluted 1:1 in ultrapure water. Critical parameters for DOFS efficiency were evaluated by univariate and multivariate analyzes and the best conditions were chosen. Thus, an aliquot of 100 μL of sample was pipetted onto filter paper, placed in a 24-well plate, dried for 60 min, and the analytes were extracted with 250 μL of extracting solvent (acetonitrile and methanol; 1:3; v:v). The complete extraction was performed in 24-well plates, allowing the analysis of several samples simultaneously. The method was validated according to international recommendations (ANSI/ASB Standard 036) and then the developed methodology was applied to 86 real samples of oral fluid. The calibration curves were constructed in a range of 1 – 100 ng/mL and the coefficients of determination (r2 ) were higher than 0.99 for all analytes; the limit of quantification values obtained ranged from 1 to 5 ng/mL; Within-run precision was from 3.05 to 13.01%; Between-run precision was from 1.97 to 8.13%; Bias ranged between -19.7 and 9.6%; Ionization suppression/enhancement study indicated a variation from -16.20 to 16.60%; A total of 86% positive samples were found, with the majority being detected COC, BE, EME, which points to the applicability of the proposed methodology. Additionally, the results obtained can contribute to the strengthening of drug surveillance actions, minimizing underreporting associated with the consumption of these substances.pt_BR
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) – Brasil; Hospital de Clínicas de Porto Alegrept_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/2056
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.relation.requiresTEXTO - Adobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/br/*
dc.subjectSubstâncias Estimulantespt_BR
dc.subjectFluído Oralpt_BR
dc.subjectDried Oral Fluid Spotpt_BR
dc.subjectLC-MS/MSpt_BR
dc.subjectAnálises Confirmatóriaspt_BR
dc.titleDesenvolvimento de um novo método bioanalítico para a determinação de drogas de abuso em fluido oral utilizando Dried Oral Fluid Spot associado à placa de 24-poços por LC-MS/MSpt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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