Os enigmáticos Staphylococcus Coagulase Negativos (SCoN): estudos de métodos de extração de DNA e tipos de SCCmec em SCoN e epidemiologia molecular e formação de biofilme de Staphylococcus epidermidis
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Data
2014
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Resumo
Os Staphylococcus coagulase negativos (SCoN) são um grupo de patógenos oportunistas que vêm crescendo em importância como agentes de infecções hospitalares relacionadas a dispositivos médicos invasivos. Além de causarem infecções de difícil tratamento, pois frequentemente são microrganismos multirresistentes e formadores de biofilme, este grupo de microrganismos também pode servir como reservatório de elementos genéticos móveis e genes de resistência para outras espécies. Neste estudo retrospectivo, foram analisados 137 isolados clínicos de SCoN provenientes do Complexo Santa Casa de Misericórdia de Porto Alegre. Primeiramente, foi comparado (com relação à quantidade e qualidade do material obtido) o rendimento de 4 métodos de extração de DNA utilizando-se espectrofotometria e PCR simples. Posteriormente, foi pesquisada a presença dos principais tipos de SCCmec utilizando-se um PCR multiplex. Em uma segunda etapa, a clonalidade dos isolados de S. epidermidis foi investigada por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) e tipagem por sequenciamento de múltiplos lócus (MLST). Os resultados obtidos foram cruzados com formação de biofilme, presença do gene icaD e multirresistência. Embora com rendimentos diferentes, os 4 métodos de extração de DNA forneceram material apropriado para amplificação em PCR simples. O método baseado em coluna de separação apresentou os melhores resultados para os SCoN. Os tipos de SCCmec mais prevalentes foram os tipos II, III e V. Muitos isolados demonstraram possuir mais de um tipo de SCCmec, apesar disso, foi encontrada maior associação com multirresistência nos isolados que possuíam apenas um tipo de SCCmec. Os métodos de tipagem molecular revelaram uma grande diversidade genética da população de S. epidermidis. Apesar disso, também foi possível reconhecer alguns grupos clonais com características em comum. Os resultados obtidos neste estudo confirmam as principais características de virulência e a grande diversidade e mobilidade genética dos SCoN, justificando continuidade de monitoramento, assim como novos estudos envolvendo este grupo de microrganismos.
Descrição
Tese (Doutorado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Staphylococcus Coagulase Negativos, Extração de DNA, Tipos de SCCmec, Biofilmes, Tipagem Molecular, [en] Staphylococcus, [en] Biofilms, [en] Molecular Typing