Identificação fenotípica e genotípica de enterococos isolados de leites e queijos de ovelhas para emprego futuro como probióticos

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dc.contributor.advisorFrazzon, Ana Paula
dc.contributor.advisor-coFrazzon, Jeverson
dc.contributor.authorSouza, Débora Buzatto de
dc.contributor.departmentPrograma de Pós-Graduação em Biociências
dc.date.accessioned2024-11-22T21:13:42Z
dc.date.available2024-11-22T21:13:42Z
dc.date.date-insert2024-11-22
dc.date.issued2021-07-14
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
dc.description.abstractOs enterococos são bactérias amplamente distribuídas na natureza, sendo encontradas também em alimentos. Nestes, seus metabólitos contribuem para o desenvolvimento de propriedades sensoriais. Além disso, a capacidade de algumas cepas em produzir peptídeos antimicrobianos (enterocinas) e compostos ácidos com atividade antimicrobiana contra bactérias patogênicas e deteriorantes de alimentos, são benéficos na indústria de alimentos. Entretanto, devido à sua capacidade de adquirir determinantes genéticos de virulência e resistência a antimicrobianos, aliado ao caráter oportunista de algumas espécies, esse gênero não possui o status de Generally recognized as safe (GRAS). A presença de enterococos resistentes a antimicrobianos e virulentos em diferentes tipos de alimentos tem sido amplamente estudada, entretanto em leites de ovelhas e queijos, são poucas as pesquisas realizadas. Tendo em vista o exposto, o objetivo do presente estudo foi identificar bactérias do gênero Enterococcus spp. em leites e queijos de ovelhas, obtidos da produção da região sul do Brasil, quanto à espécie, suscetibilidade a antimicrobianos e presença de genes de resistência e virulência, visando identificar possíveis cepas para estudos futuros de avaliação do potencial probiótico. Cento e cinquenta e seis enterococos foram isolados de amostras de leites e queijos colonial, tipo feta e tipo pecorino, identificados por MALDI-TOF, testados para suscetibilidade antimicrobiana e rastreados para genes de resistência e virulência. Os resultados do presente estudo demonstraram que E. faecalis foi a espécie mais frequente nas amostras de leites e queijos de ovelha. Porém, quando demonstrado por queijos, as amostras de queijo colonial apresentaram a maior diversidade de espécies (E. faecium, E. faecalis, E. durans e E. gallinarum) quando comparadas aos demais tipos de queijos. Nos queijos tipo feta foram isoladas as espécies E. durans (65,52%) e E. faecalis (34,48%), enquanto no tipo pecorino, apenas E. faecalis (100%) foram encontrados. Todos os isolados foram sensíveis à ampicilina, linezolida e vancomicina. Alta porcentagem de isolados não suscetíveis a pelo menos um antimicrobiano foi demonstrada, sendo tetraciclina, eritromicina, nitrofurantoína, rifampicina e estreptomicina os antimicrobianos com maior ocorrência. Os msrC e ermB genes foram detectados em 28,81% e 11,11% dos isolados não susceptíveis a eritromicina, respectivamente. Além disso, os genes tetM (98,04%) e tetL (54,90%) foram detectados nas cepas não suscetíveis à tetraciclina. Dezesseis isolados suscetíveis a todos os antibióticos avaliados foram testados quanto à presença dos genes de virulência ace, agg, cylA e gelE. Apenas 7 não apresentaram nenhum gene, sendo necessários estudos futuros para seu emprego como probiótico. Este trabalho demonstra a alta frequência (89,74%) de cepas de Enterococcus spp. resistentes e/ isolados de leites e queijos de ovelha, assim como a presença de possíveis cepas candidatas para estudos futuros para avaliação da sua capacidade probiótica.
dc.description.abstract-enEnterococci are widely distributed in nature and in food. In these, their metabolites contribute to the development of sensory properties. In addition, the ability of some strains to produce antimicrobial peptides (enterokines) and acid compounds with antimicrobial activity against pathogenic and food spoilage bacteria are beneficial in the food industry. However, due to its ability to acquire genetic determinants of virulence and resistance to antimicrobials, plus the opportunistic character of some species, this genus does not have the status of Generally recognized as safe (GRAS). The presence of antimicrobial-resistant and virulent enterococci in different types of food has been widely studied, however, in sheep milk and cheese, little research has been done. Therefore, the aim of this study was to identify Enterococcus spp. in sheep milk and cheese, obtained from production in southern Brazil, regarding species, susceptibility to antimicrobials and presence of resistance and virulence genes, aiming to identify possible strains for future studies to evaluate the probiotic potential. One hundred and fifty-six enterococci were isolated from samples of milk and colonial, feta type and pecorino type cheeses, identified by MALDI-TOF, tested for antimicrobial susceptibility and screened for resistance and virulence genes. The results of the present study showed that E. faecalis was the most frequent species in sheep milk and cheese samples. However, when demonstrated by cheeses, colonial cheese samples showed the greatest diversity of species (E. faecium, E. faecalis, E. durans and E. gallinarum) when compared to other types of cheese. In feta type cheeses, the species E. durans (65.52%) and E. faecalis (34.48%) were isolated, while in the pecorino type, only E. faecalis (100%) were found. All isolates were susceptible to ampicillin, linezolid and vancomycin. A high percentage of isolates not susceptible to at least one antimicrobial was demonstrated, with tetracycline, erythromycin, nitrofurantoin, rifampicin and streptomycin being the most frequent. The msrC and ermB genes were detected in 28.81% and 11.11% of the erythromycin not susceptible isolates, respectively. Furthermore, tetM (98.04%) and tetL (54.90%) genes were detected in tetracycline not susceptible strains. Sixteen isolates sensitive to all antibiotics evaluated were tested for the presence of virulence genes ace, agg, cylA and gelE. Only 7 did not have any gene, and further studies are 12 needed for its use as a probiotic. This work demonstrates the high frequency (89.74%) of Enterococcus spp. resistant strains isolated from sheep milk and cheese, as well as the presence of possible candidate strains for future studies to assess their probiotic capacity. Keywords: Enterococcus, sheep, food, virulence, resis
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/3066
dc.language.isopt_BR
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dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/br/
dc.subjectEnterococcuspt_BR
dc.subjectOvinospt_BR
dc.subjectAlimentospt_BR
dc.subjectVirulênciapt_BR
dc.subjectFarmacorresistência Bacteriana Múltiplapt_BR
dc.subjectProbióticopt_BR
dc.subject[en] Enterococcusen
dc.subject[en] Sheepen
dc.subject[en] Fooden
dc.subject[en] Virulenceen
dc.subject[en] Drug Resistance, Multiple, Bacterialen
dc.subject[en] Probioticsen
dc.titleIdentificação fenotípica e genotípica de enterococos isolados de leites e queijos de ovelhas para emprego futuro como probióticos
dc.typeDissertação
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