Prospecção de inibidores de Nek1 empregando compostos pirimidínicos: avaliação in silico, síntese e ensaios in vitro

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorMoura, Dinara Jaqueline
dc.contributor.advisor-coGodoi, Marla Narciso
dc.contributor.authorBatista, Danielle Pereira
dc.date.accessioned2022-06-08T14:27:27Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:21:40Z
dc.date.available2022-06-08T14:27:27Z
dc.date.available2023-10-09T13:21:40Z
dc.date.date-insert2022-06-08
dc.date.issued2021
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractOs gliomas são as doenças malignas primárias de ocorrência mais frequentes no sistema nervoso central (SNC). A Organização Mundial da Saúde (OMS) classificou os gliomas em quatro estágios. O glioblastoma multiforme (GBM) classificado como grau IV é o mais prevalente e agressivo. Os glioblastomas apresentaram baixa sobrevida, que é de 9 a 12 meses, e os tratamentos incluem cirurgia, radioterapia e quimioterapia a base de temozolomida (TMZ). Vários estudos demonstraram que a proteína Nek1, membro da família NIMA de serina/treonina cinases, é superexpresso em glioblastomas. A função dessa proteína tem sido relacionada a danos ao DNA e ao controle da progressão do ciclo celular. Diidropirimidinonas (DHPMs), por exemplo, são moléculas que se destacaram nas últimas décadas por apresentarem bioatividade, com ação antiviral, antiinflamatória, antibacteriana, anti hipertensiva e antitumoral. Diante da dificuldade no tratamento dos glioblastomas, o objetivo deste trabalho foi a busca de novo(s) inibidor(es) derivado(s) de DHPMs, tendo como alvo a proteína Nek1, utilizando estratégias in sílico e in vitro de avaliação. A partir de ensaios in sílico de eficácia e segurança, oito DHPMs foram selecionadas e, posteriormente sintetizadas, através da reação de Biginelli, e submetidas à avaliação farmacológica in vitro. Para avaliar a citotoxicidade celular, fibroblastos normais (MRC5) e linhagens de células tumorais (T98 e U87) foram analisadas por ensaio de vermelho neutro, sendo expostas a tratamentos com concentrações variando de 1 a 1000 µM, em tempos de 24 e 72 horas. Todos os compostos apresentaram efeito citotóxico nas três linhagens, porém o composto (1a) apresentou resultado significativo quanto à citotoxicidade, além da alta seletividade em relação à linhagem U87, após 24h de exposição. Além disso, avaliou-se a indução de morte do composto 1a e o resultado sugere que o composto foi capaz de levar células tumorais à morte pelo processo de apoptose e posterior necrose (morte), diminuindo significativamente as células viáveis. A união de técnicas in sílico e in vitro permitiu selcionar e avaliar um possível composto com ação antitumoral tendo como alvo a proteína Nek1. Entretanto, mais estudos são necessários para confirmar esta ação antitumoral.pt_BR
dc.description.abstract-enGliomas are the most common primary malignancies of the central nervous system (CNS). The World Health Organization (WHO) classifies gliomas into four stages. Glioblastoma multiforme (GBM) classified as grade IV is the most prevalent and aggressive. Glioblastomas have a low survival, which is 9 to 12 months, and treatments include surgery, radiotherapy and chemotherapy based on temozolomide (TMZ). Several studies have shown that Nek1, a member of the NIMA family of serine/threonine kinases, is overexpressed in glioblastomas. The function of this protein has been linked to DNA damage and control of cell cycle progression. Dihydropyrimidinones (DHPMs), for example, are molecules that have stood out in recent decades for their bioactivity, with antiviral, anti-inflammatory, antibacterial, antihypertensive and antitumor actions. Given the difficulty in treating glioblastomas, the aim of this work was to search for new inhibitor(s) derived from DHPMs, targeting the Nek1 protein, using in silico and in vitro evaluation strategies. From in silico efficacy and safety assays, eight DHPMs were selected and subsequently synthesized, through the Biginelli reaction, and submitted to in vitro pharmacological evaluation. To assess cell cytotoxicity, normal fibroblasts (MRC5) and tumor cell lines (T98 and U87) were analyzed by neutral red assay, being exposed to treatments with concentrations ranging from 1 to 1000 µM, at times of 24 and 72 hours. All compounds showed a cytotoxic effect in cell lines tested, but the compound (1a) showed a significant result in terms of cytotoxicity, in addition to the high selectivity in relation to strain U87, after 24 hours of exposure. Furthermore, the induction of death of compound 1a was evaluated and the result suggests that the compound was able to lead tumor cells to death by the process of apoptosis and subsequent necrosis, significantly reducing viable cells. The combination of in silico and in vitro techniques allowed selecting and evaluating a possible compound with antitumor action targeting the Nek1 protein. However, more studies are needed to confirm this antitumor activity.pt_BR
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Rio Grande do Sul (FAPERGS)pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/1864
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.publisherWagner Wessfllpt_BR
dc.relation.requiresTEXTO - Adobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.subjectNek1pt_BR
dc.subjectCompostos Pirimidínicospt_BR
dc.subjectAvaliação In Silicopt_BR
dc.subjectTestes In Vitropt_BR
dc.subject[en] In Vitro Techniquesen
dc.titleProspecção de inibidores de Nek1 empregando compostos pirimidínicos: avaliação in silico, síntese e ensaios in vitropt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
Arquivos
Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
[DISSERTAÇÃO] Batista, Danielle Pereira (C).pdf
Tamanho:
2.81 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Texto completo
Baixar
Coleções
PPGBIO - Dissertações