Prospecção de inibidores de Nek1 empregando compostos pirimidínicos: avaliação in silico, síntese e ensaios in vitro

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Data
2021
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Editora
Wagner Wessfll
Editor Literário
Resumo
Os gliomas são as doenças malignas primárias de ocorrência mais frequentes no sistema nervoso central (SNC). A Organização Mundial da Saúde (OMS) classificou os gliomas em quatro estágios. O glioblastoma multiforme (GBM) classificado como grau IV é o mais prevalente e agressivo. Os glioblastomas apresentaram baixa sobrevida, que é de 9 a 12 meses, e os tratamentos incluem cirurgia, radioterapia e quimioterapia a base de temozolomida (TMZ). Vários estudos demonstraram que a proteína Nek1, membro da família NIMA de serina/treonina cinases, é superexpresso em glioblastomas. A função dessa proteína tem sido relacionada a danos ao DNA e ao controle da progressão do ciclo celular. Diidropirimidinonas (DHPMs), por exemplo, são moléculas que se destacaram nas últimas décadas por apresentarem bioatividade, com ação antiviral, antiinflamatória, antibacteriana, anti hipertensiva e antitumoral. Diante da dificuldade no tratamento dos glioblastomas, o objetivo deste trabalho foi a busca de novo(s) inibidor(es) derivado(s) de DHPMs, tendo como alvo a proteína Nek1, utilizando estratégias in sílico e in vitro de avaliação. A partir de ensaios in sílico de eficácia e segurança, oito DHPMs foram selecionadas e, posteriormente sintetizadas, através da reação de Biginelli, e submetidas à avaliação farmacológica in vitro. Para avaliar a citotoxicidade celular, fibroblastos normais (MRC5) e linhagens de células tumorais (T98 e U87) foram analisadas por ensaio de vermelho neutro, sendo expostas a tratamentos com concentrações variando de 1 a 1000 µM, em tempos de 24 e 72 horas. Todos os compostos apresentaram efeito citotóxico nas três linhagens, porém o composto (1a) apresentou resultado significativo quanto à citotoxicidade, além da alta seletividade em relação à linhagem U87, após 24h de exposição. Além disso, avaliou-se a indução de morte do composto 1a e o resultado sugere que o composto foi capaz de levar células tumorais à morte pelo processo de apoptose e posterior necrose (morte), diminuindo significativamente as células viáveis. A união de técnicas in sílico e in vitro permitiu selcionar e avaliar um possível composto com ação antitumoral tendo como alvo a proteína Nek1. Entretanto, mais estudos são necessários para confirmar esta ação antitumoral.
Descrição
Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Nek1, Compostos Pirimidínicos, Avaliação In Silico, Testes In Vitro, [en] In Vitro Techniques
Citação