Papel da proteína Pso2 na resposta a danos no DNA do tipo ICL em Saccharomyces cerevisiae

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorMoura, Dinara Jaqueline
dc.contributor.advisor-coHenriques, João Antonio Pêgas
dc.contributor.authorAzevedo, Thais Raupp
dc.date.accessioned2021-11-29T22:38:45Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:21:43Z
dc.date.available2021-11-29T22:38:45Z
dc.date.available2023-10-09T13:21:43Z
dc.date.date-insert2021-11-29
dc.date.issued2021
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractAs pontes intercadeias (interstrand crosslink, ICL) entre compostos e DNA são lesões bastante citotóxicas que afetam os processos de replicação e transcrição da molécula de DNA.. A cisplatina (CIS), um antineoplásico, é um agente bifuncional que se liga covalentemente às bases do DNA podendo formar ICLs. A proteína Pso2 foi identificada inicialmente em Saccharomyces. cerevisiae e demonstrou estar envolvida na reparação de danos induzidos por agentes bifuncionais, executando função de exonuclease e endonuclease. O complexo MRX (Mre11, Rad50 e Xrs2) está envolvido na resposta a danos no DNA e uma das funções bioquímicas desse complexo é a capacidade de realizar incisões no esqueleto fosfodiéster do DNA com sua atividade endonucleásica. As cepas mutantes do gene KIN3 são sensíveis a diferentes agentes indutores de dano ao DNA e as proteínas Kin3 e MRX interagem geneticamente de maneira epistática após o estresse mutagênico. Neste trabalho, propomos um modelo 3D da estrutura do Pso2, assim como verificamos a existência de interação genética desta proteína com o complexo MRX e Kin3, durante o tratamento com CIS. Curvas de sobrevivência para avaliar a sensibilidade de mutantes simples e duplos dessas proteínas foram realizadas em diferentes concentrações de cisplatina, por 2 horas e 24 horas. Os simples mutantes pso2Δ, rad50Δ e mre11Δ apresentaram um aumento de citotoxicidade concentração dependente nos dois tempos de tratamentos, enquanto os mutantes de kin3Δ e xrs2Δ apresentaram uma sensibilidade menos pronunciada. Por outro lado, os duplos mutantes kin3Δpso2Δ, rad50Δpso2Δ, xrs2Δpso2Δ e mre11Δpso2Δ apresentaram ausência de sensibilidade após 2 e 24 horas de tratamento com cispatina. Para entender a reversão da sensibilidade nos duplos mutantes, avaliamos a expressão das nucleases MRE11, DNA2 e EXO1 nas cepas xrs2Δ, pso2Δ e xrs2Δpso2Δ. Os resultados da superexpressão de EXO1 e MRE11 em pso2Δ indicam um substrato comum entre esses genes.pt_BR
dc.description.abstract-enInterstrand crosslink (ICL) between compounds and DNA are very cytotoxic lesions that affect the replication and transcription processes of the DNA molecule. Cisplatin (CIS), an antineoplastic agent, is a bifunctional agent that covalently binds to the bases of DNA and can form ICLs. The Pso2 protein was initially identified in Saccharomyces cerevisiae and has been shown to be involved in the repair of damage induced by bifunctional agents, performing exonuclease and endonuclease functions. The MRX complex (Mre11, Rad50 and Xrs2) is involved in the response to DNA damage and one of the biochemical func tions of this complex is the ability to make incisions in the DNA phosphodiester skeleton since have endonuclease activity. The mutant strains of the KIN3 gene are sensitive to dif ferent agents that damage DNA, beside the Kin3 and MRX proteins interact genetically in an epistatic manner after mutagenic stress. In this work, we propose a 3D model of the structure of Pso2, as well as we verify the existence of genetic interaction of this protein with the MRX and Kin3 complex, during treatment with CIS. Survival curves to assess the sensitivity of single and double mutants of these proteins were performed at different con centrations of cisplatin, for 2 hours and 24 hours. The simple mutants pso2Δ, rad50Δ and mre11Δ showed a similar reduction in survival in both treatments, while the kin3Δ and xrs2Δ mutants showed a less pronounced sensitivity. On the other hand, the double mu tants kin3Δpso2Δ, rad50Δpso2Δ, xrs2Δpso2Δ and mre11Δpso2Δ showed high survival after 2 and 24 hours of treatment. To understand the reversal of sensitivity in the double mutants, we evaluated the expression of the MRE11, DNA2 and EXO1 nucleases in the xrs2Δ, pso2Δ and xrs2Δpso2Δ strains. The results of overexpression of EXO1 and MRE11 in pso2Δ indicate a common substrate between these genes.pt_BR
dc.description.sponsorshipFAPERGSpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/1806
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.publisherWagner Wessfllpt_BR
dc.relation.requiresTEXTO - Adobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/*
dc.subjectProteína Pso2pt_BR
dc.subjectDNApt_BR
dc.subjectSaccharomyces cerevisiaept_BR
dc.titlePapel da proteína Pso2 na resposta a danos no DNA do tipo ICL em Saccharomyces cerevisiaept_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
Arquivos
Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
[DISSERTAÇÃO] Azevedo, Thais Raupp.pdf
Tamanho:
1.21 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Texto completo
Baixar
Coleções
PPGBIO - Dissertações