Desenvolvimento de um novo método bioanalítico para a determinação de drogas de abuso em fluido oral utilizando Dried Oral Fluid Spot associado à placa de 24-poços por LC-MS/MS

Abstract

O uso de substâncias psicoativas, em especial as drogas de abuso, representa um grave problema socioeconômico e de saúde pública. O consumo de drogas está associado ao aumento das ocorrências de patologias e injúrias, incluindo manifestações neuropsiquiátricas e overdoses. Nesse contexto, o desenvolvimento de novas técnicas para a detecção de drogas de abuso em matrizes biológicas não convencionais, como o fluido oral, pode ser uma importante ferramenta para verificação do uso dessas substâncias. Este trabalho teve como objetivo desenvolver e validar um novo método bioanalítico utilizando dried oral fluid spot (DOFS) para a determinação de cocaína, benzoilecgonina, éster metil ecgonina, cocaetileno, hidroxicocaína, anfetamina, metanfetamina, MDMA, MDA, MDEA, femproporex, fenciclidina e cetamina em fluido oral por cromatografia líquida e espectrometria de massas em tandem. As amostras de fluido oral foram coletadas por expectoração e diluídas na proporção 1:1 (v:v) em água ultrapura. Os parâmetros críticos para a eficiência do DOFS foram avaliados por análises univariadas e multivariadas e as melhores condições foram escolhidas. Assim, uma alíquota de 100 μL de amostra foi pipetada no papel filtro, alocada em uma placa de 24-poços, seca durante 60 min, e os analitos foram extraídos com 250 μL do solvente extrator (acetonitrila e metanol; 1:3; v:v). A extração completa foi realizada em placas de 24-poços, possibilitando a análise de várias amostras simultaneamente. O método foi validado de acordo com recomendações internacionais (ANSI/ASB Standard 036) e em seguida a metodologia desenvolvida foi aplicada em 86 amostras de fluido oral. As curvas de calibração foram construídas na faixa de 1 – 100 ng/mL e os coeficientes de determinação (r 2 ) foram superiores a 0,99 para todos os

analitos; os valores de limite de quantificação obtidos variaram de 1 a 5 ng/mL; Precisão intra- corridas foi de 3,05 a 13,01%; Precisão entre-corridas foi de 1,97 a 8,13%. O estudo de

supressão/ganho de ionização indicou uma variação de -16,20 a 16,60%. Um total de 86% amostras positivas foi encontrado, sendo majoritariamente COC, BE, EME o que aponta para a aplicabilidade da metodologia proposta. Adicionalmente, os resultados obtidos podem colaborar para o fortalecimento de ações de toxicovigilância, minimizando as subnotificações associadas ao consumo destas substâncias.