Comparação entre os métodos de antigenemia e de PCR em tempo real para citomegalovírus em transplantados renais
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Data
2019
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Editor
Wagner Wessfll
Resumo
Introdução: O citomegalovírus (CMV) é considerado o patógeno de maior
importância clínica em pacientes transplantados renais. Objetivos:
Desenvolver e validar um ensaio in-house de PCR em tempo real (qPCR) para
CMV calibrado com o 1º Padrão Internacional da Organização Mundial da
Saúde e comparar com o exame de antigenemia em uma coorte de pacientes
transplantados renais. Além disso, estabelecer ponto de corte para início da
terapia preemptiva. Material e Métodos: Para desenvolvimento e validação do
ensaio foram realizados testes de otimização, sensibilidade e especificidade
analíticas, precisão e reprodutibilidade interlaboratorial. A comparação entre as
metodologias foi feita por análise descritiva, coeficiente de Kappa e correlação
de Spearman. Foi realizada uma análise de curva ROC para determinar um
ponto de corte para início de tratamento. Resultados: O ensaio desenvolvido
se mostrou sensível, específico, preciso e linear. 232 amostras de 30 pacientes
foram analisadas para antigenemia e qPCR. Os resultados mostraram que 163
(70,26%) amostras eram concordantes. Dos 69 com resultados discordantes,
54 (78,26%) foram positivos no teste de qPCR dias antes ou depois da
antigenemia. O teste qPCR apresentou mediana de 12 dias (0–25) para
positivação antes da antigenemia e de 9 dias (0–28) para negativação após a
antigenemia. O coeficiente Kappa apresentou concordância justa (0,435; p
<0,001), a correlação de Spearman se apresentou moderada (0,663; p <0,001).
A análise da curva ROC encontrou um ponto de corte de 3.430 UI/ml (Log 3,53)
(p <0,001) com base em 10 células/105
leucócitos na antigenemia e na decisão
de tratamento pelo médico. Conclusão: As metodologias apresentaram
concordância justa e correlação moderada. O qPCR apresentou-se como um teste sensível, permitindo melhor avaliação da DNAemia nos pacientes,
obtendo resultados positivos semanas antes da antigenemia. O ponto de corte
estabelecido neste estudo permite a validação do teste para a população de
nossa instituição, como sugerem diretrizes internacionais.
Descrição
Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Patologia, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Citomegalovirus, Infecções por Citomegalovirus, PCR em Tempo Real, Antigenemia, [en] Cytomegalovirus, [en] Cytomegalovirus Infections, [en] Real-Time Polymerase Chain Reaction