PPGBIO - Dissertações
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Item Inibição de biofilmes bacterianos por resíduos obtidos do processamento de soja (Glycine max)(2019) Ramos, Francine dos Santos; Zimmer, Karine RigonO reaproveitamento de resíduos agroindustriais tem sido alvo de diversas pesquisas, uma vez que apresentam uma rica composição química, seu descarte gera custos às indústrias e prejuízos ao meio ambiente. Entre esses resíduos destacam-se os da soja, um grão com comprovadas atividades benéficas à saúde humana. A busca por compostos ativos contra biofilmes, definidos como comunidades microbianas aderidas a superfícies, tem sido extremamente importante, uma vez que são considerados desafios nos ambientes clínicos e industriais. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a potencial atividade antibiofilme e antimicrobiana de extratos obtidos de resíduos do processamento da soja contra as bactérias Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Pseudomonas aeruginosa. Os resíduos obtidos foram submetidos a um processo de extração por ultrassom, utilizando-se água como solvente. As atividades antibacteriana e antibiofilme de dois extratos brutos foram avaliadas por absorbância (620 nm), contagem de UFC e método de cristal violeta. O extrato obtido de fragmentos de grão e cascas (E1) apresentou maior atividade antibiofilme, sendo escolhido para caracterização química por cromatografia em camada delgada e métodos colorimétricos, tratamentos térmico e enzimático, fracionamento em coluna cromatográfica (CC – cromatografia de exclusão molecular) e processos de ultracentrifugação. E1 (4 mg/mL) inibiu em 75% a formação de biofilme por S. epidermidis sem inibição de crescimento. A caracterização química mostrou a presença de aminoácidos, saponinas, terpenos e esteroides. A atividade antibiofilme de E1 foi perdida quando este foi submetido a tratamento térmico enquanto o tratamento enzimático levou a perda de 30% na atividade do extrato, sugerindo que as moléculas antibiofilme podem ser de origem proteica. Duas frações obtidas da CC foram capazes de inibir em aproximadamente 35% a formação de biofilme de S. epidermidis. A partir do processo de ultracentrifugação, a atividade antibiofilme foi observada apenas quando duas frações (fração> 50 kDa e fração <10 kDa) foram combinadas, sugerindo que a atividade biológica é dependente do sinergismo das moléculas ativas. Nossos resultados demonstraram que o efeito antibiofilme é alcançado com apenas 6 h de tratamento com E1 e sugere que a atividade biológica é via efeito físico, uma vez que sua propriedade antibiofilme é observada apenas quando em contato direto com as células bacterianas. Além disso, o tratamento agudo com o E1 não causou nenhum efeito tóxico em Caenorhabditis elegans, no entanto, a exposição crônica causou redução na sobrevivência d vermes, aumento do tamanho corporal e aumento da expressão de GST-4. Este trabalho mostra que os resíduos agroindustriais da soja podem ser uma fonte potencial de moléculas com atividade contra biofilmes bacterianos e com baixa toxicidade in vivo, sendo esta manejada pela concentração utilizada.