Extração e caracterização de células tronco mesenquimais de tecidos humanos de descarte (pele e limbo esclerocorneal) e análise da sinalização purinérgica

dc.contributor.advisorWink, Márcia Rosângela
dc.contributor.authorNaasani, Liliana Sous
dc.date.accessioned2017-08-01T18:08:32Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:59:11Z
dc.date.available2017-08-01T18:08:32Z
dc.date.available2023-10-09T13:59:11Z
dc.date.date-insert2017-08-01
dc.date.issued2017
dc.description.abstractA córnea é um tecido avascular transparente que proporciona proteção e apresenta propriedades de refração para a estrutura interna do olho. A pele humana não é apenas o maior órgão do corpo, mas também constitui-se em um dos mais complexos e importantes para a proteção contra agressões externas. Ambos tecidos atuam como uma barreira contra agentes externos, podendo ser físicos, químicos, patogênicos ou microbianos. Devido à alta taxa de pacientes com patologias da pele e córnea, como queimaduras, inflamação e cicatrização de feridas, reforça a importância de terapias alternativas para o tratamento dessas patologias. Tanto a córnea como a pele apresentam populações de células tronco mesenquimais (MSCs) com capacidade de auto-renovação, proliferação e potencial de diferenciação multi-linhagem e, por causa deste potencial, têm sido consideradas como uma fonte de células para o seu uso em medicina regenerativa, engenharia de tecidos e outras aplicações em dermatologia e oftalmologia, cujo mecanismo ainda está sob investigação. Tem-se demonstrado que os nucleotídeos extracelulares têm efeitos biológicos nas MSCs, alterando a proliferação, migração, diferenciação e apoptose. Portanto, mais informações sobre estes processos são cruciais para compreender a fisiologia destas células para o estabelecimento de futuras aplicações clínicas utilizando o seu potencial de diferenciação, mas sem efeitos secundários indesejáveis. Neste trabalho foram isoladas MSCs de tecido esclerocorneal e de pele humana, ambos considerados materiais de descarte, e foi demonstrado o seu potencial de diferenciação multi-linhagem e a expressão de marcadores mesenquimais. Foram avaliadas a expressão de ectoenzimas, a atividade enzimática de degradação de nucleotídeos extracelulares e o metabolismo de ATP extracelular em células mesenquimais isoladas da derme (D-MSCs) e do limbo esclerocorneal (L-MSCs). As DMSCs e L-MSCs hidrolisaram baixos níveis de ATP extracelular e altos níveis de AMP, levando ao acúmulo de adenosina que pode regular a inflamação e o reparo tecidual. Além disso, demonstraram uma baixa atividade das nucleotídeo pirofosfatases/fosfodiesterases. Estas células expressaram mRNA para ENTPD1, 2, 3, 5 e 6, NPP1 e 2 o que corresponde com a atividade enzimática observada. Deste modo, considerando a degradação de ATP, as L-MSCs são muito semelhantes às D-MSCs. Assim, as células limbais podem ser outra fonte de MSCs a serem estudadas em modelos pré-clínicos e estudos potencialmente clínicos.pt_BR
dc.description.abstract-enCornea is a transparent avascular tissue that provides protection and refractive properties for the internal structure of the eye; in turn, human skin is not only the largest organ in the body, but also one of the most complex and important for protection against external aggressions. Both tissues act as a barrier against external agents that can be physical, chemical, pathogenic or microbial usually. Due to the high rate of patients with skin and corneal pathologies such as burns, inflammation and wound healing, it reinforces the importance of alternative therapies for the treatment of these pathologies. Cornea and the skin have a populations of mesenchymal stem cells (MSCs) capable of self-renewal, proliferation and potential for multiline differentiation. Because of this potential, they have been considered as a source of cells to be used in regenerative medicine, tissue engineering and other applications in dermatology and ophthalmology, whose mechanisms are still under investigation. Extracellular nucleotides have been shown to have biological effects on MSCs, altering proliferation, migration, differentiation and apoptosis. Therefore, more information about o these processes would be crucial to understand the physiology of these cells for the establishment of future clinical applications using their differentiation potential, but without undesirable side effects. In this work, MSCs were isolated from sclerocorneal tissue and human skin, both considered as discard materials, and their potential for multilineage differentiation and the expression of mesenchymal markers were demonstrated. The expression of ectoenzymes, the enzymatic activity of degradation of extracellular nucleotides and extracellular ATP metabolism in dermal mesenchymal stem cells (D-MSCs) and limbal mesenchymal stem cell (L-MSCs) were evaluated. D-MSCs and L-MSCs hydrolyzed low levels of extracellular ATP and high levels of AMP, leading to accumulation of adenosine that can regulate inflammation and tissue repair. In addition, they demonstrated a low activity of the nucleotide pyrophosphatases/phosphodiesterases. These cells expressed mRNA for ENTPD1, 2, 3, 5 and 6, NPP1 and 2 which corresponds to the enzymatic activity observed. Thus, considering the degradation of ATP, L-MSCs are very similar to D-MSCs. Therefore, L-MSCs may be another source of MSCs to be studied in preclinical models and potentially clinical studies.pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/512
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.relation.requiresAdobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediato*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/*
dc.subjectCélulas Mesenquimaispt_BR
dc.subjectDermept_BR
dc.subjectLimbo Esclerocornealpt_BR
dc.subjectATPpt_BR
dc.subjectAdenosinapt_BR
dc.subjectEctoenzimaspt_BR
dc.subjectRegeneração Tecidualpt_BR
dc.subject[en] Dermisen
dc.subject[en] Adenosine Triphosphateen
dc.subject[en] Adenosineen
dc.titleExtração e caracterização de células tronco mesenquimais de tecidos humanos de descarte (pele e limbo esclerocorneal) e análise da sinalização purinérgicapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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