Análise da expressão dos genes de reparo do DNA no carcinoma papilar da tireoide
| dc.contributor.advisor | Saffi, Jenifer | |
| dc.contributor.advisor-co | Meyer, Erika | |
| dc.contributor.author | Lutz, Bruna Schwengber | |
| dc.date.accessioned | 2017-07-31T18:56:54Z | |
| dc.date.accessioned | 2023-10-09T14:00:19Z | |
| dc.date.available | 2017-07-31T18:56:54Z | |
| dc.date.available | 2023-10-09T14:00:19Z | |
| dc.date.date-insert | 2017-07-31 | |
| dc.date.issued | 2017 | |
| dc.description.abstract | O carcinoma papilar da tireoide (CPT) é responsável por até 80% dos tumores malignos da tireoide, sendo que a maioria dos pacientes apresentam um desfecho favorável. No entanto, 5% a 20% dos pacientes desenvolvem recorrência local e 10% apresentam metástases. Apesar da etiologia do CPT ainda ser desconhecida, a exposição à radiação ionizante é relatada como o principal fator de risco ambiental. Alguns polimorfismos foram descritos em genes envolvidos em sistemas de reparo do DNA, como XRCC1 (reparo de excisão de bases - BER), XPD (reparo de excisão de nucleotídeos - NER) e XRCC3 (recombinação homóloga - HR). Além disso, a hipermetilação do hMLH1 (reparo de mal pareamento - MMR) está associada à tumorigênese da tireoide promovida por mutações em BRAF. Deste modo, as alterações nos níveis de expressão gênica dos mecanismos de reparo do DNA podem estar associadas com o desenvolvimento e a progressão de tumores da tireoide. Considerando a carência de dados sobre o comportamento dos diferentes sistemas de reparo do DNA e a ausência de estudos pareados no CPT, o objetivo deste estudo foi investigar a expressão de genes representativos das principais vias de reparo do DNA, a presença da mutação BRAFV600E e suas associações com características clínico-patológicas. Trinta e duas amostras de CPT e tecido tireoidiano normal adjacente foram obtidas de pacientes submetidos à tireoidectomia total. A expressão gênica de MGMT (reparo direto); MLH1 e MSH2 (MMR); OGG1, APE1 e XRCC1 (BER); XPD (NER); XRCC2, XRCC3, RAD51 (HR); KU80 (junção de extremidades não homólogas - NHEJ) foi avaliada por PCR em tempo real. A expressão gênica foi calculada através do método ΔΔCT e normalizada através dos genes de controle interno, ACTB e B2M. A análise da expressão proteica de MGMT e XRCC2 em amostras de CPT foi realizada por imunohistoquímica. A mutação BRAFV600E foi investigada através de sequenciamento direto. A média de idade foi de 39,8 ± 14 anos e a proporção de mulheres foi de 87,5%. A mediana do tamanho do tumor foi de 2,4 cm (0,7-6,3). MGMT e XRCC2 tiveram, respectivamente, diminuição de 0,36 vezes (p=0,038) e aumento de 0,53 vezes (p=0,003) na expressão gênica quando comparado com o tecido normal adjacente. A diminuição da expressão do gene MGMT foi associada com tamanho tumoral inferior a 2 cm (p=0,040), presença de metástase em linfonodos (p=0,002) e risco intermediário de recorrência (p=0,002). A expressão proteica de XRCC2 foi associada com invasão local mínima (p=0,040). A mutação BRAFV600E foi encontrada em 59% dos casos e correlacionada com a expressão de MLH1 (p=0,037) e XPD (p=0,025). Estes resultados, particularmente para o MGMT, sugerem que diferentes níveis de expressão de genes de reparo do DNA estão associados à agressividade tumoral e podem ter um papel no prognóstico do CPT | pt_BR |
| dc.description.abstract-en | Papillary thyroid carcinoma (PTC) is responsible for up to 80% of malignant thyroid tumors and the majority of patients have a favorable outcome. However, 5%–20% of patients may develop local recurrence while 10% may have distant metastasis. Despite the etiology of PTC is still unknown, exposure to ionizing radiation is reported as the main environmental risk factor. Some polymorphisms have been described in genes involved in DNA repair systems, such as XRCC1 (base excision repair - BER), XPD (nucleotide excision repair - NER) and XRCC3 (homologous recombination - HR). In addition, hypermethylation of hMLH1 (mismatch repair - MMR) is associated with BRAFpromoted thyroid tumorigenesis. Thus, alterations in gene expression levels of DNA repair mechanisms can be associated with development and progression of thyroid tumors. Considering the lack of data on the behavior of different DNA repair systems and the absence of paired studies in PTC, the purpose of this study was to investigate the expression of representative genes of the main DNA repair pathways, the presence of the BRAFV600E mutation and its associations with clinicopathological features. Thirty-two samples of PTC and surrounding normal thyroid tissue were obtained from patients undergoing total thyroidectomy. The gene expression of MGMT (direct repair); MLH1 and MSH2 (MMR); OGG1, APE1 and XRCC1 (BER); XPD (NER); XRCC2, XRCC3, RAD51 (HR); KU80 (non-homologous end joining - NHEJ) were evaluated by real time RT-PCR Array system. Gene expression was calculated through ∆∆CT method and normalized by two housekeeping genes, ACTB and B2M. Protein expression of MGMT and XRCC2 in PTC samples was obtained by immunohistochemistry. The BRAFV600E mutation was screened through direct sequencing. Mean age was 39,8±14 years and the proportion of females was 87,5%. The median of tumor size was 2.4 cm (0,7-6,3). MGMT and XRCC2 were, respectively, 0,36 fold decreased (p=0,038) and 0,53 fold increased (p=0,003) gene expression. Decreased MGMT gene expression was associated with tumor size less than 2 cm (p=0,040), lymph node metastasis presence (p=0,002) and intermediate risk of recurrence (p=0,002). XRCC2 protein expression was associated with minimum local invasion (p=0,040). BRAFV600E mutation was found in 59% of the cases and was correlated with MLH1 (p=0,037) and XPD expression (p=0,025). These results, particularly for MGMT, suggest that different levels in DNA repair gene expression are associated with tumor aggressiveness and may play a prognostic role in PTC. | pt_BR |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/498 | |
| dc.language.iso | pt_BR | pt_BR |
| dc.relation.requires | Adobe Reader | pt_BR |
| dc.rights | Acesso Aberto Imediato | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ | * |
| dc.subject | Carcinoma Papilar | pt_BR |
| dc.subject | Tireoide | pt_BR |
| dc.subject | Reparo do DNA | pt_BR |
| dc.subject | Expressão Gênica | pt_BR |
| dc.subject | BRAFV600E | pt_BR |
| dc.subject | Agressividade Tumoral | pt_BR |
| dc.subject | [en] Carcinoma, Papillary | en |
| dc.subject | [en] Thyroid Gland | en |
| dc.subject | [en] DNA Repair | en |
| dc.subject | [en] Gene Expression | en |
| dc.title | Análise da expressão dos genes de reparo do DNA no carcinoma papilar da tireoide | pt_BR |
| dc.type | Dissertação | pt_BR |