Uso do ensaio cometa em diferentes modelos experimentais de treinamento de força, suplementação nutricional e de insuficiência cardíaca em ratos

dc.contributor.advisorRhoden, Cláudia Ramospt_BR
dc.contributor.advisor-coNunes, Ramiro Barcospt_BR
dc.contributor.authorStefani, Giuseppe Potrick
dc.date.accessioned2016-07-07T18:51:13Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:59:50Z
dc.date.available2016-07-07T18:51:13Z
dc.date.available2023-10-09T13:59:50Z
dc.date.date-insert2016-07-07
dc.date.issued2015
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractIntrodução: O Ensaio Cometa tem sido utilizado como uma ferramenta muito sensível ao detectar dano ao DNA nuclear. Apesar de seu uso ser quase estritamente à ensaios in vitro e in vivo toxicológicos, sua aplicação é pouco explorada em estudos de nutrição esportiva e de cardiologia. O treinamento de força (TF) é capaz de induzir adaptações fisiológicas e bioquímicas. Tem se observado que algumas suplementações ergogênicas poderiam aumentar o seu efeito observado sobre parâmetros bioquímicos. A suplementação de L-arginina (Arg) é pouco explorada do ponto de vista genotóxico. Assim como modelos experimentais de nutrição esportiva,trabalhos em cardiologia experimental, principalmente em relação à estudos com insuficiência cardíaca (IC), ainda não foram investigados sobre o ponto de vista de dano em DNA. O dano persistente em DNA pode trazer desfechos significativamente prejudiciais para células afetadas e, portanto, aumentando o risco de gerar disfunções ou até mesmo participar direta e indiretamente na patogênese de doenças. Objetivos:Utilizar a técnica do ensaio cometa em diferentes situações experimentais de TF associado a suplementação de Arg, bem como à IC induzida pelo infarto agudo do miocárdio (IAM) em ratos. Métodos: Foi utilizado um total de 35 ratos machos Wistar. Destes, 23 animais foram alocados ao estudo 1 e 2, envolvendo a associação do TF com Arg sobre parâmetros bioquímicos. Por fim, 12 animais foram alocados ao estudo 3, os quais foram submetidos à cirurgia de IAM pela ligadura da artéria coronariana (LAC) para avaliar dano em DNA e sua relação com variáveis hemodinâmicas. Para o estudo 1 e 2 foram realizados protocolos de oito semanas de TF e suplementação de Arg a que se sucedeu em análise hemodinâmica, análise bioquímica e dano em DNA em linfócitos. Para o estudo 3, os animais IC sofreram IAM pela LAC e os animais Sham não sofreram oclusão da artéria coronariana. Após seis semanas, foi realizado a análise da função hemodinâmica, área de infarto, hipertrofia cardíaca, congestão hepática e pulmonar e dano em DNA em diferentes células (ventrículo esquerdo, pulmão, diafragma, gastrocnêmio e sóleo). Resultados: Quanto ao estudo 1, com resultados preliminares, o TF demonstrou proteger o dano em DNA em linfócitos e a associação com Arg protegeu ainda mais o dano genotóxico. Em relação ao estudo 2, foi observado que após análise estatística mais aprofundada, a suplementação de Arg influenciou significativamente a proteção contra o dano em DNA em linfócitos, em maior intensidade que o TF. A Arg influenciou em maior concentração de testosterona total,HSP72 extracelular e menor concentração de ácido úrico, bem como influenciou na hipertrofia cardíaca no grupo sedentário suplementado. Em relação ao estudo 3, a IC demonstrou maior dano em DNA em todas as células de diferentes tecidos e foi positivamente correlacionada com disfunção ventricular esquerda e congestão pulmonar. Conclusão: Os resultados de proteção e dano em DNA tanto em linfócitos e em diferentes células refletem que através de desenhos experimentais apropriados é possível utilizar o Ensaio Cometa como uma ferramenta sensível e enriquecedora da investigação científica a fim de tornar o resultado observado mais robusto.pt_BR
dc.description.abstract-enIntroduction: The Comet Assay has been used as a very sensitive tool to detect damage to nuclear DNA. Although its use is almost strictly to the in vitro and in vivo toxicology studies, its application is poorly explored in sports nutrition and in cardiology. Resistance training (RT) is able to induce physiological and biochemical adaptations. It has been observed that some ergogenic supplements could increase their observed effect on biochemical parameters. The supplementation of L-arginine (Arg) is underexplored of genotoxic tests. As well as in experimental models of sports nutrition, experimental studies in cardiology, especially regarding chronic heart failure (CHF), have not been investigated on the point of view of DNA damage. The lingering damage to DNA can induce significantly harmful outcomes for affected cells and thus, increasing the risk of developing organic dysfunctions or even participate directly and indirectly in the pathogenesis of diseases. Aims: Using the technique of the Comet Assay in different experimental situations of RT associated with Arg supplementation, and the CHF induced by myocardial infarction (MI) in rats. Methods: A total of 35 male Wistar rats was used. Of these, 23 animals were allocated to the study 1 and 2, involving the association of RT with Arg on biochemical parameters. Finally, 12 animals were allocated to the study 3, which were submitted to MI surgery for coronary artery ligation (CAL) to assess DNA damage and its relationship with hemodynamic variables. For study 1 and 2, the protocols lengthened eight weeks of RT and Arg supplementation which succeeded in hemodynamic, biochemical analysis and DNA damage in lymphocytes. For the study 3, the CHF animals underwent MI by CAL and Sham rats had not the artery ligation. After six weeks, it was performed the analysis of hemodynamic function, area of infarction, cardiac hypertrophy, hepatic and pulmonary congestion and DNA damage in different cells (left ventricle, lungs, diaphragm, gastrocnemius and soleus). Results: Regarding the study 1, with preliminary results, the RT showed protection of DNA damage in lymphocytes and the association with Arg protected further genotoxic damage. Regarding the study 2, it was further observed that after statistical analysis, Arg supplementation significantly influenced the protection against DNA damage in lymphocytes, a larger extent than RT alone. The Arg influenced to a greater concentration of total testosterone, extracellular HSP72 and lower uric acid concentration, as well as influenced cardiac hypertrophy in the sedentary supplemented group. In relation to the study 3, the CHF group showed greater DNA damage in all different tissues and it was positively correlated with left ventricular dysfunction and with pulmonary congestion. Conclusion: The protection and results in DNA damage both in lymphocytes and in different cells reflect that by appropriate experimental designs, the Comet Assay can be used as a sensitive and enriching tool for scientific investigation, in order to render more robust results.en
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/159
dc.language.isootherpt_BR
dc.relation.requiresAdobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediato*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/*
dc.subjectDano ao DNApt_BR
dc.subjectArgininapt_BR
dc.subjectHemodinâmicapt_BR
dc.subjectEnsaio Cometapt_BR
dc.subjectEstresse Oxidativopt_BR
dc.subjectInsuficiência Cardíacapt_BR
dc.subject[en] DNA Damageen
dc.subject[en] Arginineen
dc.subject[en] Hemodynamicsen
dc.subject[en] Comet Assayen
dc.subject[en] Oxidative Stressen
dc.subject[en] Heart Failureen
dc.titleUso do ensaio cometa em diferentes modelos experimentais de treinamento de força, suplementação nutricional e de insuficiência cardíaca em ratospt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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