Uso do ensaio cometa em diferentes modelos experimentais de treinamento de força, suplementação nutricional e de insuficiência cardíaca em ratos
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Data
2015
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Introdução: O Ensaio Cometa tem sido utilizado como uma ferramenta muito sensível ao detectar dano ao DNA nuclear. Apesar de seu uso ser quase estritamente à ensaios in vitro e in vivo toxicológicos, sua aplicação é pouco explorada em estudos de nutrição esportiva e de cardiologia. O treinamento de força (TF) é capaz de induzir adaptações fisiológicas e bioquímicas. Tem se observado que algumas suplementações ergogênicas poderiam aumentar o seu efeito observado sobre parâmetros bioquímicos. A suplementação de L-arginina (Arg) é pouco explorada do ponto de vista genotóxico. Assim como modelos experimentais de nutrição esportiva,trabalhos em cardiologia experimental, principalmente em relação à estudos com insuficiência cardíaca (IC), ainda não foram investigados sobre o ponto de vista de dano em DNA. O dano persistente em DNA pode trazer desfechos significativamente prejudiciais para células afetadas e, portanto, aumentando o risco de gerar disfunções ou até mesmo participar direta e indiretamente na patogênese de doenças. Objetivos:Utilizar a técnica do ensaio cometa em diferentes situações experimentais de TF associado a suplementação de Arg, bem como à IC induzida pelo infarto agudo do miocárdio (IAM) em ratos. Métodos: Foi utilizado um total de 35 ratos machos Wistar. Destes, 23 animais foram alocados ao estudo 1 e 2, envolvendo a associação do TF com Arg sobre parâmetros bioquímicos. Por fim, 12 animais foram alocados ao estudo 3, os quais foram submetidos à cirurgia de IAM pela ligadura da artéria coronariana (LAC) para avaliar dano em DNA e sua relação com variáveis hemodinâmicas. Para o estudo 1 e 2 foram realizados protocolos de oito semanas de TF e suplementação de Arg a que se sucedeu em análise hemodinâmica, análise bioquímica e dano em DNA em linfócitos. Para o estudo 3, os animais IC sofreram IAM pela LAC e os animais Sham não sofreram oclusão da artéria coronariana. Após seis semanas, foi realizado a análise da função hemodinâmica, área de infarto, hipertrofia cardíaca, congestão hepática e pulmonar e dano em DNA em diferentes células (ventrículo esquerdo, pulmão, diafragma, gastrocnêmio e sóleo). Resultados: Quanto ao estudo 1, com resultados preliminares, o TF demonstrou proteger o dano em DNA em linfócitos e a associação com Arg protegeu ainda mais o dano genotóxico. Em relação ao estudo 2, foi observado que após análise estatística mais aprofundada, a suplementação de Arg influenciou significativamente a proteção contra o dano em DNA em linfócitos, em maior intensidade que o TF. A Arg influenciou em maior concentração de testosterona total,HSP72 extracelular e menor concentração de ácido úrico, bem como influenciou na hipertrofia cardíaca no grupo sedentário suplementado. Em relação ao estudo 3, a IC demonstrou maior dano em DNA em todas as células de diferentes tecidos e foi positivamente correlacionada com disfunção ventricular esquerda e congestão pulmonar. Conclusão: Os resultados de proteção e dano em DNA tanto em linfócitos e em diferentes células refletem que através de desenhos experimentais apropriados é possível utilizar o Ensaio Cometa como uma ferramenta sensível e enriquecedora da investigação científica a fim de tornar o resultado observado mais robusto.
Descrição
Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Dano ao DNA, Arginina, Hemodinâmica, Ensaio Cometa, Estresse Oxidativo, Insuficiência Cardíaca, [en] DNA Damage, [en] Arginine, [en] Hemodynamics, [en] Comet Assay, [en] Oxidative Stress, [en] Heart Failure