Determinação de substâncias psicoativas em amostras de humor vítreo por meio de microextração em fase sólida utilizando folha de cortiça

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dc.contributor.advisorOliveira, Tiago Franco dept_BR
dc.contributor.advisor-coEller, Sarahpt_BR
dc.contributor.authorOssanes, Daniela Souzapt_BR
dc.date.accessioned2023-04-18T18:35:51Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:59:03Z
dc.date.available2023-04-18T18:35:51Z
dc.date.available2023-10-09T13:59:03Z
dc.date.date-insert2023-04-18
dc.date.issued2023
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractHá um número crescente de pessoas afetadas em todo o mundo por distúrbios de saúde mental, como depressão e ansiedade. Uma das principais linhas de tratamento, em conjunto com a psicoterapia, é o uso de medicamentos psicotrópicos, como antidepressivos e benzodiazepínicos. Além disso, o uso não prescrito dessas substâncias é um problema de saúde pública preocupante. Portanto, a análise de medicamentos psicotrópicos é obrigatória na toxicologia postmortem e para essa detecção, várias amostras biológicas podem ser empregadas, entre elas destaca-se o humor vítreo (VH), um líquido aquoso localizado no interior do globo ocular, isolado da redistribuição e contaminação bacteriana. Além disso, há uma demanda por metodologias de extração mais sustentáveis e eficientes de acordo com a química verde, e um exemplo são as técnicas de microextração em fase sólida (SPME), que usam um sorvente sólido e pequenas quantidades de solvente. Os biossorventes são substâncias de origem natural com propriedades sortivas, e têm sido utilizados com sucesso em técnicas de microextração sólida no campo da toxicologia ambiental, na análise de água, principalmente. Assim, o objetivo deste estudo foi desenvolver uma metodologia de SPME sustentável, rápida, barata e simples usando tiras de folha de cortiça como biossorvente, para detecção de antidepressivos e benzodiazepínicos em amostras de VH por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas em modo tandem (LC-MS/MS). A metodologia de extração foi conduzida em placas de 96 poços e foi realizada a otimização dos parâmetros relevantes para a extração. Para a otimização do solvente, dois experimentos simplex-centroide foram planejados para extração e dessorção e para avaliar o tempo e pH, um experimento de design Doehlert foi realizado. As melhores condições para os solventes de extração e dessorção foram, respectivamente, uma mistura 1:1 de acetonitrila e etanol, e uma mistura 1:1:1 de acetonitrila, acetato de etila e éter metil terc-butílico (MTBE). Quanto aos experimentos de design Doehlert, uma melhor extração foi adquirida em 15 minutos e em pH neutro de 7. Posteriormente, o método analítico para determinação e quantificação de 17 substâncias por LC-MS/MS foi validado. Quanto à validação do método, os limites de quantificação foram de 5 ng/mL para todos os analitos e as curvas de calibração foram lineares entre 5 e 30 ng/mL. Por fim, este estudo foi capaz de desenvolver um método de microextração eficiente, barato, simples e rápido para 17 analitos em amostras de VH, usando tiras de folha de cortiça para extração e uma placa de 96 poços como recipiente. Além disso, este sistema de abordagem poderia ser possivelmente automatizado para laboratórios toxicológicos de rotina.pt_BR
dc.description.abstract-enThere is an increasing number of people affected worldwide by mental health disorders such as depression and anxiety. One of the main courses of treatment, along with psychotherapy, is the use of psychoactive medications, like antidepressants and benzodiazepines. Also, the unprescribed use of these substances is a concerning public health issue. Hence, the analysis of psychotropic medications is mandatory in postmortem toxicology and various biological samples can be used for this detection, among them the vitreous humor (VH) stands out, an aqueous liquid located inside the eyeball, isolated from redistribution and bacterial contamination. In addition to this, there is a demand for more sustainable and more efficient extraction methodologies according to green chemistry. An example is solid phase microextraction techniques (SPME), which use a solid sorbent and small solvent amounts. Biosorbents are substances of natural origin with sorptive properties, and they have been successfully used in solid-phase microextraction techniques in environmental toxicology for water analysis, mainly. Ultimately, the aim of this study was to develop a sustainable, fast, cheap, and simple SPME methodology using cork sheet stripes as a biosorbent, to extract antidepressants, benzodiazepines, and others from vitreous humor samples for posterior analysis through liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The extraction methodology was conducted in a 96-well plate and optimization of relevant parameters for extraction was performed. For solvent optimization, two simplex-centroid experiments were planned for extraction and desorption and to evaluate time and pH, a Doehlert design experiment was performed. The best conditions for extraction and desorption solvents were, respectively, a 1:1 mixture of acetonitrile and ethanol, and a 1:1:1 mixture of acetonitrile, ethyl acetate and methyl tert-butyl ether (MTBE). As for the Doehlert design experiments, a better extraction was achieved in 15 minutes and at a neutral pH of 7. Subsequently, the analytical method for determination and quantification of 17 substances by LC-MS/MS was validated. As for the method validation, the quantification limits were 5 ng/mL for all analytes and the calibration curves were linear between 5 and 30 ng/mL. Finally, this study was able to develop an efficient, cheap, simple, and fast microextraction method for 17 analytes in VH samples, using strips of cork sheet for extraction and a 96-well plate as a container. Furthermore, this approach system could possibly be automated for routine toxicology laboratories.pt_BR
dc.description.sponsorshipCAPESpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/2074
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.relation.requiresTEXTO - Adobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.subjectHumor vítreopt_BR
dc.subjectFármacos psicoativospt_BR
dc.subjectEspectrometria de massaspt_BR
dc.subjectCortiçapt_BR
dc.subject[en] Vitreous bodyen
dc.subject[en] Psychotropic Drugsen
dc.subject[en] Mass Spectrometryen
dc.subject[en] Plant barken
dc.titleDeterminação de substâncias psicoativas em amostras de humor vítreo por meio de microextração em fase sólida utilizando folha de cortiçapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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