Determinação de substâncias psicoativas em amostras de humor vítreo por meio de microextração em fase sólida utilizando folha de cortiça
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Data
2023
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Resumo
Há um número crescente de pessoas afetadas em todo o mundo por distúrbios de saúde mental,
como depressão e ansiedade. Uma das principais linhas de tratamento, em conjunto com a
psicoterapia, é o uso de medicamentos psicotrópicos, como antidepressivos e
benzodiazepínicos. Além disso, o uso não prescrito dessas substâncias é um problema de saúde
pública preocupante. Portanto, a análise de medicamentos psicotrópicos é obrigatória na
toxicologia postmortem e para essa detecção, várias amostras biológicas podem ser
empregadas, entre elas destaca-se o humor vítreo (VH), um líquido aquoso localizado no
interior do globo ocular, isolado da redistribuição e contaminação bacteriana. Além disso, há
uma demanda por metodologias de extração mais sustentáveis e eficientes de acordo com a
química verde, e um exemplo são as técnicas de microextração em fase sólida (SPME), que
usam um sorvente sólido e pequenas quantidades de solvente. Os biossorventes são substâncias
de origem natural com propriedades sortivas, e têm sido utilizados com sucesso em técnicas de
microextração sólida no campo da toxicologia ambiental, na análise de água, principalmente.
Assim, o objetivo deste estudo foi desenvolver uma metodologia de SPME sustentável, rápida,
barata e simples usando tiras de folha de cortiça como biossorvente, para detecção de
antidepressivos e benzodiazepínicos em amostras de VH por cromatografia líquida acoplada a
espectrometria de massas em modo tandem (LC-MS/MS). A metodologia de extração foi
conduzida em placas de 96 poços e foi realizada a otimização dos parâmetros relevantes para a
extração. Para a otimização do solvente, dois experimentos simplex-centroide foram planejados
para extração e dessorção e para avaliar o tempo e pH, um experimento de design Doehlert foi
realizado. As melhores condições para os solventes de extração e dessorção foram,
respectivamente, uma mistura 1:1 de acetonitrila e etanol, e uma mistura 1:1:1 de acetonitrila,
acetato de etila e éter metil terc-butílico (MTBE). Quanto aos experimentos de design Doehlert,
uma melhor extração foi adquirida em 15 minutos e em pH neutro de 7. Posteriormente, o
método analítico para determinação e quantificação de 17 substâncias por LC-MS/MS foi
validado. Quanto à validação do método, os limites de quantificação foram de 5 ng/mL para
todos os analitos e as curvas de calibração foram lineares entre 5 e 30 ng/mL. Por fim, este
estudo foi capaz de desenvolver um método de microextração eficiente, barato, simples e rápido
para 17 analitos em amostras de VH, usando tiras de folha de cortiça para extração e uma placa
de 96 poços como recipiente. Além disso, este sistema de abordagem poderia ser possivelmente
automatizado para laboratórios toxicológicos de rotina.
Descrição
Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Humor vítreo, Fármacos psicoativos, Espectrometria de massas, Cortiça, [en] Vitreous body, [en] Psychotropic Drugs, [en] Mass Spectrometry, [en] Plant bark