Investigação do mecanismo de citotoxicidade do óleo essencial de Piper gaudichaudianum Kunth em células V79
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Data
2015
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Resumo
Introdução: O óleo essencial (OE) das folhas de Piper gaudichaudianum
Kunth possui propriedades biológicas, tais como anti-inflamatória,
antimicrobiana e antitumoral. Previamente, foi demonstrado que este OE
possui pronunciada ação citotóxica, mutagênica e genotóxica em células V79,
como consequência do potencial oxidativo do mesmo. O presente trabalho
pretende ampliar o conhecimento sobre o seu mecanismo de citotoxicidade.
Objetivos: Avaliar a citotoxicidade e o mecanismo de ação do OE em células
V79, por meio da análise da composição química do OE, viabilidade celular,
função mitocondrial, formação de radicais livres, proteínas envolvidas na
resposta celular, indução de morte celular e ação da N-acetilcisteína, após o
tratamento com diferentes concentrações do OE, durante 3 h e 24 h.
Material e Métodos: O OE foi extraído por hidrodestilação e analisado por GC
FID e GC-MS. A viabilidade celular e o efeito da N-acetilcisteína foram
verificados com Azul de Trypan; a formação de espécies reativas, com DCFH
DA; a função mitocondrial com Rodamina 123; o tipo de morte celular, com
Anexina V-PE e 7-AAD; a atividade da superóxido dismutase e catalase por
espectrofotometria; e, a expressão de PADPR e SIRT-1 por Western Blotting.
Resultados: Foram identificados como componentes majoritários (E)-nerolidol
(31,13%), α-humuleno (14,83%) e (E)-cariofileno (6,79%). O OE diminuiu a
viabilidade celular, com IC50 de 4,15 µg/mL (3 h) e 4,49 µg/mL (24 h);
aumentou a despolarização mitocondrial e a produção de espécies reativas;
reduziu a atividade da superóxido dismutase; aumentou a expressão de
PADPR e diminuiu a de SIRT1; induziu a morte celular por necrose e apoptose
tardia; O pré-tratamento celular com N-acetilcisteína restabeleceu a viabilidade
celular.
Conclusão: O OE exerce efeito citotóxico, concentração-dependente, pela
indução de estresse oxidativo celular com envolvimento de dano mitocondrial e
modulação da resposta antioxidante e de reparo no DNA.
Descrição
Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Patologia, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Piper gaudichaudianum Kunth, Óleos, Citotoxicidade Imunológica, [en] Oils, [en] Cytotoxicity, Immunologic