Desenvolvimento e validação de método por LC-MS/MS para determinação de vancomicina em amostras de plasma em papel filtro seco

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dc.contributor.advisorOliveira, Tiago Franco de
dc.contributor.advisor-coDallegrave, Eliane
dc.contributor.authorVidal, Fernanda Ribeiro
dc.date.accessioned2022-05-11T17:37:56Z
dc.date.accessioned2023-10-09T13:59:04Z
dc.date.available2022-05-11T17:37:56Z
dc.date.available2023-10-09T13:59:04Z
dc.date.date-insert2022-05-11
dc.date.issued2021
dc.descriptionDissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.pt_BR
dc.description.abstractA vancomicina é considerada um agente antimicrobiano eficaz para o tratamento de infecções gram-positivas graves. A importância do monitoramento terapêutico dos antimicrobianos tem levado ao desenvolvimento de técnicas analíticas mais específicas, capazes de identificar com precisão a concentração dessa substância no organismo. Assim, nesse trabalho foi proposta uma metodologia para determinação de vancomicina em amostras de plasma em papel filtro seco e análise por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. Uma alíquota de 10 µL de plasma foi transferida para o disco de papel e completamente seca em temperatura ambiente. A extração foi realizada após papel ter sido cortado e transferindo para um micro tubo de polipropileno, utilizando-se tampão fosfato de sódio, e padrão interno polimixina. A mistura foi agitada, centrifugada e uma alíquota de 5 μL foi injetada no sistema UHPLC-MS / MS. A otimização foi conduzida por planejamento experimental e validada; os valores de precisão intra e inter-dia, nos níveis de concentração mais baixos, foram sempre inferiores a 20%, considerando seu desvio padrão relativo. Quanto aos valores de exatidão, estes também foram satisfatórios (acima de 80%). Este método foi aplicado com sucesso a 75 amostras de pacientes submetidos à terapia com vancomicina. Este trabalho conseguiu atingir seus objetivos de otimizar, validar a metodologia analítica e analisar amostras de plasma de pacientes em uso de vancomicina. O método apresentou boa correlação com o método imunoenzimático atual, sendo possível sua aplicabilidade na prática clínica de acompanhamento terapêutico.pt_BR
dc.description.abstract-enVancomycin is used as antimicrobial agent for the treatment of severe gram-positive infections. The importance of therapeutic monitoring of antimicrobials has led to the development of more specific analytical techniques capable of identifying with accuracy the concentration of this substance in the organism. Thus, in this work, a methodology for the determination of vancomycin in plasma samples on dry filter paper and analysis by liquid chromatography coupled to mass spectrometry was proposed. An aliquot of 10 µL of plasma was transferred on the paper disk and completely dried under at room temperature. The extraction was performed after the paper had been cut and transferred to a to a polypropylene microtube, using sodium phosphate buffer, and internal standard polymyxin. The mixture was shaken, centrifuge, and a 5 μL aliquot was injected into the UHPLC-MS/MS system. The optimization was conducted by experimental planning and validated; the intra and inter-day precision values, at the lowest concentration levels, were always less than 20%, considering their relative standard deviation. As for the accuracy values, these were also satisfactory (above 80%). This method was successfully applied to 75 samples of patients undergoing vancomycin therapy. This work was able to achieve its goals of optimizing, validating the analytical methodology and analyzing plasma samples from patients using vancomycin. The method showed good correlation with the current immunoenzymatic method, and its applicability in the clinical practice of therapeutic monitoring is possible.pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/1849
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.publisherWagner Wessfllpt_BR
dc.relation.requiresTEXTO - Adobe Readerpt_BR
dc.rightsAcesso Aberto Imediatopt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/*
dc.subjectManchas de Plasma Secopt_BR
dc.subjectVancomicinapt_BR
dc.subjectMonitoramento Terapêutico de Fármacospt_BR
dc.subjectToxicologia Clínicapt_BR
dc.subjectLC-MS/MSpt_BR
dc.subject[en] Vancomycinen
dc.titleDesenvolvimento e validação de método por LC-MS/MS para determinação de vancomicina em amostras de plasma em papel filtro secopt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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