Navegando por Autor "Naranjo, Cesar David Guerra"
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Item Desenvolvimento de um método para extrair DNA total de amostras biológicas empregando uma substância caotrópica e vidro reciclado como fonte de sílica(Wagner Wessfll, 2021) Naranjo, Cesar David Guerra; Frazzon, Ana Paula Guedes; Aguirre, Tanira Alessandra SilveiraAs relações funcionais e interacionais entre ácidos nucléicos e proteínas são o arcabouço estrutural para estudos de biologia molecular. Nesse contexto, a obtenção de um material genético de alta qualidade é uma etapa crítica para aplicações downstream. Diante disso, desenvolvemos um método de extração para obtenção de DNA de alta qualidade de forma segura, ecológica e aplicável para diversos tipos de amostras biológicas. Para isso, três tipos diferentes de vidro reciclado de laboratório à base de borosilicato foram usados como fonte de sílica e iodeto de sódio como sal caotrópico, que se tornou uma ferramenta poderosa para lise celular e extração de DNA. Este método foi usado para extrair o DNA de diferentes amostras biológicas, incluindo amostras fecais e culturas de bactérias e fungos. Todas as amostras também foram analisadas com um kit comercial para comparação dos resultados. O controle de qualidade dos DNAs extraídos baseou-se na quantificação da concentração e pureza por espectrofotometria, e a integridade foi determinada por eletroforese em gel de agarose. Adicionalmente, os DNAs extraídos foram submetidos à amplificação da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), para verificação da viabilidade para processos downstream. Os resultados mostraram que nosso método apresentou maior pureza e integridade total dos DNAs extraídos em comparação ao kit comercial, e o rendimento não foi estatisticamente diferente. Finalmente, o novo método de extração de DNA pode ser reproduzível e aplicável em um processo posterior como PCR.
