Padronização dos protocolos de marcadores imuno-histoquímicos para uso em plataforma de automação
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Data
2015
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Resumo
Introdução: A demanda pelo exame imuno-histoquímico na rotina diagnóstica
nos laboratórios de Anatomia Patológica cresce exponencialmente. A
introdução de biofármacos dirigidos a moléculas-alvo exige resultados precisos,
neste contexto, há uma tendência nos laboratórios de introduzir a automação
em imuno-histoquímica. O presente estudo foi desenvolvido no Laboratório de
Anatomia Patológica do Complexo Hospitalar Santa Casa de Porto Alegre no
ano de 2012. Objetivo: realizar a padronização de 120 anticorpos primários
concentrados provenientes de diversos fabricantes na Plataforma de
automação Benchmark XT (Ventana Medical Systems/Roche Tissue
Diagnostics, Tucson AZ, EUA). Critério de inclusão: foram selecionados para
a padronização os 120 anticorpos concentrados utilizados com maior
frequência no laboratório. Para os testes foram selecionadas 41 amostras de
tecido contendo o antígeno de interesse, provenientes de peças cirúrgicas,
fixadas em formalina 10% tamponada e positivas em reação Imuno
histoquímica manual. Resultados: Foram padronizados 120 marcadores. O
protocolo mais frequente foi uso de recuperação antigênica com Cell
Conditioning 1 por 60 minutos e incubação no anticorpo primário por 32
minutos a 42ºC. A diluição mais frequente foi 1:100. Conclusão: A automação
atende às exigências de padronização concomitante ao aumento da demanda.
Esperamos que o manual desenvolvido seja referência para trabalhos futuros e
aos laboratórios com interesse em automatizar sua rotina imuno-histoquímica.
Descrição
Tese (Doutorado)-Programa de Pós-Graduação em Patologia, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
Palavras-chave
Anticorpos, Automação, Imuno-Histoquímica, [en] Antibodies, [en] Automation, [en] Immunohistochemistry