Mattevi, Vanessa SuñéHerter, Amanda2023-10-192023-10-192023-08-29https://repositorio.ufcspa.edu.br/handle/123456789/2368Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto AlegreA prevalência das doenças invasivas causadas por fungos oportunistas tem aumentado nos últimos anos. Os fungos do gênero Candida são os principais agentes etiológicos, estando associados a taxas de mortalidade de até 70%. O diagnóstico da candidíase invasiva permanece difícil e demorado graças à utilização de métodos que exigem o isolamento do fungo em meio de cultura, impedindo o tratamento adequado no tempo certo. A técnica de LAMP se mostra uma alternativa promissora para o diagnóstico da infecção, por ser simples, rápida e de baixo custo. Este trabalho teve como objetivo investigar a viabilidade da utilização dessa metodologia na identificação de diferentes espécies de Candida e Nakaseomyces glabrata (Candida glabrata), analisando especificidade, sensibilidade e custoefetividade. Os isolados de Candida spp. e N. glabrata foram aquecidos a 65°C por 30 minutos com Chelex-100 para o isolamento do DNA e as reações de LAMP utilizaram primers com sequências-alvo nas regiões ITS2 e SAP1. A especificidade foi determinada pela inclusão de outras espécies de Candida e outros gêneros de fungos e a sensibilidade analítica foi estimada através de uma diluição em série de DNA. Foram realizados testes quanto ao desempenho da reação direto em matriz biológica (sangue em garrafa de hemocultura e em tubo de EDTA). Ainda, foi realizada a análise de custo-efetividade do LAMP, comparando o uso de kit comercial e da técnica in house. Os resultados de especificidade e sensibilidade analítica foram 100% e 100pg/μL, respectivamente. A sensibilidade diagnóstica variou entre 75% e 100% conforme a espécie e o tempo de reação. O LAMP direto em matriz biológica atingiu resultados satisfatórios no sangue em EDTA. A análise de custo-efetividade demonstrou que o uso do kit comercial é mais vantajoso devido ao menor tempo de resultado, maior facilidade de execução e menor risco de contaminação, apesar de a técnica in house apresentar o menor custo. A técnica de LAMP apresentou resultados promissores de especificidade e sensibilidade e se mostra um método com potencial para implementação em laboratórios pequenos e com poucos recursos.pt-BRAcesso Aberto ImediatoMicologiaDiagnóstico laboratorialDiagnóstico molecularCandidíase[en] Mycology[en] Laboratory diagnosis[en] Molecular diagnosi[en] CandidiasisDissertação