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[DISSERTAÇÃO] Gauthier, Mariana FragaTexto parcial1,28 MBAdobe PDFView/Open
Title: Efeito da dieta materna sobre o estresse oxidativo e a expressão gênica dos receptores de prolactina e de estrógeno alfa no tecido adiposo e no hipotálamo da prole de camundongos
Authors: Gauthier, Mariana Fraga
metadata.dc.contributor.advisor: Giovenardi, Márcia
metadata.dc.contributor.advisor-co: Almeida, Silvana de
Issue Date: 2019
Keywords: Estresse Oxidativo
Metabolismo Energético
Restrição Calórica
Dieta
Hipotálamo
Tecido Adiposo
[en] Oxidative Stress
[en] Energy Metabolism
[en] Caloric Restriction
[en] Diet
[en] Hypothalamus
[en] Adipose Tissue
Abstract: INTRODUÇÃO: O estado nutricional da genitora durante a gestação e a lactação tem suma importância não só no desenvolvimento fetal como também no perfil metabólico desse animal na vida adulta. A exposição ambiental da mãe pode contribuir para a promoção da reprogramação fetal, repercutindo de alguma forma na prole quando adulta. A proposta de avaliar os efeitos da nutrição materna (hipercalórica ou restrição calórica), bem como a dieta que a prole recebe após o desmame na expressão gênica dos receptores de prolactina (Prlr) e de estrógeno alfa (Esr1) no tecido adiposo e no hipotálamo de genitoras e camundongos machos é pioneira. OBJETIVOS: Avaliar o perfil metabólico em camundongos fêmeas, parâmetros de estresse oxidativo no tecido adiposo e a expressão gênica dos receptores de prolactina (Prlr) e de estrógeno alfa (Esr1) no tecido adiposo e no hipotálamo das genitoras e de seus filhotes machos que receberam dieta controle (CONT), restrição calórica (RD) ou hipercalórica (HD). METODOLOGIA: As mães foram alimentadas com sua respectiva dieta durante o acasalamento, gestação e lactação, e os filhotes após o desmame. Os grupos experimentais foram abreviados de acordo com as dietas materna em CONT, RD ou HD e dietas maternas/prole: CONT/CONT, CONT/RD, CONT/HD, RD/CONT, RD/RD, RD/HD, HD/CONT, HD/RD, HD/HD. O perfil lipídico, glicose, insulina e concentração sérica de leptina foram analisados por ELISA, seguindo as instruções do kit, somente nas genitoras. A formação de espécies reativas de oxigênio (ROS), as atividades das enzimas catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD) foram analisadas no tecido adiposo das fêmeas e na prole machos. A análise da expressão gênica relativa dos receptores Prlr e Esr1 no tecido adiposo e hipotálamo, foi feita através da reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) e calculados pela fórmula 2-ΔΔCt. RESULTADOS: Encontramos um aumento significativo nos níveis de triglicerídeos, na concentração de leptina e diminuição na atividade da SOD das mães alimentadas com dieta HD. Mães RD apresentaram um aumento no tempo para engravidar. Também foi observado menor expressão do Prlr nos grupos de genitoras HD e RD no hipotálamo. Quando analisamos a prole, filhotes de mãe RD apresentaram menor ganho de peso no período da lactação, também observamos efeito da dieta materna (dieta HD) no aumento de DCF nos grupos HD/CONT e HD/HD. Aumento da atividade da SOD nos grupos HD/CONT, HD/RD e HD/HD. Aumento da atividade da CAT no tecido adiposo do grupo HD/RD. A expressão gênica dos receptores Prlr e Esr1 no tecido adiposo da prole apresentou uma diminuição significativa no grupo RD/RD. No hipotálamo a expressão do Prlr na prole esteve diminuída significativamente no grupo RD/RD e RD/HD, a expressão do Esr1 também esteve diminuída significativamente no grupo RD/HD. CONCLUSÃO: Observamos efeito da dieta materna na expressão dos receptores Prlr e Esr1, relacionados ao metabolismo energético, bem como no desbalanço do estresse oxidativo a nível hipotalâmico e periférico, impactando na saúde da prole na vida adulta.
metadata.dc.description.abstract-en: INTRODUCTION: The nutritional state of the dams during lactation and pregnancy is of great importance, not only in the fetal development, but also in the metabolic profile of these animals in adult life. Several studies have shown that the environmental exposure of the mother can contribute to the promotion of fetal reprogramming, affecting in some way the offspring as adults. The proposal to evaluate the effects of maternal nutrition (hypercaloric or caloric restriction), as well as the diet that the offspring received after weaning, on the gene expression of prolactin and estrogen alpha receptors in the adipose tissue and hypothalamus, of dams and their male offspring, is pionner. OBJECTIVES: Evaluate the metabolic profile in mice dams, parameters of oxidative stress in the adipose tissue, and gene expression of the prolactin (Prlr) and alpha estrogen (Esr1) receptors in the adipose tissue and hypothalamus, in dams and in their male offspring that received control (CONT), caloric restriction (RD), or hypercaloric diets (HD). METHODOLOGY: The mothers were fed their respective diet during mating, pregnancy and lactation, and the offspring received after weaning. Experimental groups names were abbreviated according to maternal diets: CONT, RD or HD and maternal/offspring diets: CONT/CONT, CONT/RD, CONT/HD, RD/CONT, RD/RD, RD/HD, HD/CONT, HD/RD, HD/HD. The lipid profile, glucose, insulin, and serum leptin concentration were analyzed by ELISA, following the kit instructions only in the dams. The reactive oxygen species (ROS) production and the activities of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) enzymes were analyzed in the adipose tissue of dams and male offspring. The analysis of the Prlr and Esr1 relative gene expression in the adipose tissue and hypothalamus was performed by Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction (qPCR), and calculated by the 2-ΔΔCT method. RESULTS: We found a significant increase in triglycerides and leptin levels, and a decrease in the SOD activity in the mothers fed with a HD diet. RD dams showed an increase in time to get pregnant. It was also observed in the dams a lower expression of Prlr in the HD and RD groups in the hypothalamus. When we analyzed the offspring, pups of RD dams showed lower weight gain in the lactation period, we also observed the effect of the maternal diet (HD diet) in the increase of DCF in the HD/CONT and HD/HD groups; increased SOD activity in the HD/CONT, HD/RD, and HD/HD groups; increase of CAT activity in the HD/RD group in the adipose tissue. The gene expression of the Prlr and Esr1 receptors in the adipose tissue of the offspring showed a significant decrease in the RD/RD group. The Prlr expression in the offspring was significantly decreased in the RD/RD and RD/HD groups in the hypothalamus. The expression of Esr1 also showed a significant decrease in the RD/HD group in the hypothalamus. CONCLUSION: We observed an effect of the maternal diet in the expression of Prlr and Esr1 receptors, which are related to energy metabolism, as well as the disbalance of oxidative stress at hypothalamic and peripheral levels, impacting the health of the offspring in the adult life.
Description: Dissertação (Mestrado)-Programa de Pós-Graduação em Biociências, Fundação Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre.
metadata.dc.rights: Atribuição-NãoComercial-CompartilhaIgual 4.0 Internacional
metadata.dc.relation.requires: Adobe Reader
metadata.dc.date.date-insert: 2020-01-08
metadata.dc.type: Dissertação
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