Navegando por Autor "Pilar, Emily Ferreira Salles"

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    Avaliação imuno-histoquímica de PIK3CA e PTEN no câncer de mama HER2-positivo
    (Wagner Wessfll, 2020) Felicidade, Sidnei Iensen; Roehe, Adriana Vial; Pilar, Emily Ferreira Salles
    Introdução: o carcinoma invasivo de mama HER2-positivo ocorre entre 15 a 20% entre os carcinomas de mama e as ferramentas laboratoriais mais utilizadas para seu diagnóstico e classificação para o tratamento com anti-HER2 são a imuno-histoquímica (IHQ) e hibridização in situ. Porém, pode ocorrer falha neste tratamento, através de mecanismos associados à rota mTOR, pelos quais os genes PTEN e PIK3CA estão envolvidos. Com isso, o conhecimento sobre os níveis de expressão destes genes, pode contribuir para uma melhor estratificação e tratamento personalizado destes pacientes. Objetivos: avaliar a expressão de PIK3CA e PTEN por IHQ em carcinomas de mama HER2 positivos e correlacionando os resultados com parâmetros clínico-patológicos. Materiais e Métodos: foram estudadas, retrospectivamente, 50 amostras (biópsias virgens de tratamento) de pacientes com diagnóstico de carcinoma de mama HER2-positivo. As amostras foram submetidas a IHQ para PTEN (Abcam-ab31392) e PIK3CA (Abcam-ab152155), em plataforma automatizada. A análise dos resultados foi realizada por dois observadores independentes, de modo semiquantitativo, sendo avaliadas percentagem de células positivas (0 a 100%) e intensidade de marcação (0 a 3), com posterior criação de um escore (0-300 pontos). Os dados foram submetidos a análise estatística, sendo considerados estatisticamente significativos valores de p< a 0,05. Resultados: A expressão imuno-histoquímica do anticorpo PIK3CA foi positiva em 86% das amostras. A perda de expressão de PTEN foi observada em 46% dos casos. A expressão dos marcadores não apresentou correlação significativa entre si e nem com os parâmetros clínico-patológicos estudados: grau tumoral, estadiamento, RE, RP, Ki67, recidiva. A expressão positiva de PIK3CA esteve associada com diminuição da mortalidade na amostra estudada (P= 0.016) e maior tempo de sobrevida das paci entes (p=0.001). O marcador PTEN não mostrou efeito significativo na análise de sobrevida. Conclusões: A expressão de PIK3CA mostrou efeito protetor em relação ao tempo de sobrevida das pacientes com Câncer de Mama HER-positivo.
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    Padronização dos protocolos de marcadores imuno-histoquímicos para uso em plataforma de automação
    (2015) Pilar, Emily Ferreira Salles; Zettler, Cláudio Galleano
    Introdução: A demanda pelo exame imuno-histoquímico na rotina diagnóstica nos laboratórios de Anatomia Patológica cresce exponencialmente. A introdução de biofármacos dirigidos a moléculas-alvo exige resultados precisos, neste contexto, há uma tendência nos laboratórios de introduzir a automação em imuno-histoquímica. O presente estudo foi desenvolvido no Laboratório de Anatomia Patológica do Complexo Hospitalar Santa Casa de Porto Alegre no ano de 2012. Objetivo: realizar a padronização de 120 anticorpos primários concentrados provenientes de diversos fabricantes na Plataforma de automação Benchmark XT (Ventana Medical Systems/Roche Tissue Diagnostics, Tucson AZ, EUA). Critério de inclusão: foram selecionados para a padronização os 120 anticorpos concentrados utilizados com maior frequência no laboratório. Para os testes foram selecionadas 41 amostras de tecido contendo o antígeno de interesse, provenientes de peças cirúrgicas, fixadas em formalina 10% tamponada e positivas em reação Imuno histoquímica manual. Resultados: Foram padronizados 120 marcadores. O protocolo mais frequente foi uso de recuperação antigênica com Cell Conditioning 1 por 60 minutos e incubação no anticorpo primário por 32 minutos a 42ºC. A diluição mais frequente foi 1:100. Conclusão: A automação atende às exigências de padronização concomitante ao aumento da demanda. Esperamos que o manual desenvolvido seja referência para trabalhos futuros e aos laboratórios com interesse em automatizar sua rotina imuno-histoquímica.